利用生物传感分析仪测定葡萄糖和L- 乳酸

发布时间：2014-08-05

　　材料与方法
　　主要仪器和试剂
　　SBA-40C型生物传感分析仪:山东省科学院生物研究所研制。其测定葡萄糖和L-乳酸的原理分别是:D-葡萄糖+H2O葡萄糖氧化酶D-葡萄糖酸+H2O2,L-乳酸+O2乳酸氧化酶-酮戊二酸+H2O2。
　　FA1004N型电子天平(0.0001g):上海天谱分析仪器有限公司生产。
　　含0.100%葡萄糖和0.050%L-乳酸的标准液,随SBA-40C型生物传感分析仪配给;反应标准缓冲液(生物传感分析仪专用);随SBA-40C型生物传感分析仪配给。磷酸缓冲液:参照有关文献配制;其它试剂均是分析纯。
　　实验程序和方法
　　实验操作严格按照生物传感分析仪操作手册执行,新酶膜的酶活性单位是4500u,工作酶膜酶活性单位低限是100u。实验中葡萄糖的浓度0.100%,乳酸的浓度0.050%,二者均在仪器的测量范围内。
　　1、重复性实验用标准液每隔2min测定1次,连续测定20次。
　　2、线性关系试验由0.100%的葡萄糖溶液和0.050%的L-乳酸标准溶液稀释得到各自不同浓度的溶液,用pH7.0的0.1mol/L磷酸缓冲液稀释。
　　3、pH对L-乳酸和葡萄糖测定的影响通过高浓度磷酸缓冲液改变仪器测定时的pH值。用不同pH值的1mol/L磷酸缓冲液稀释得到0.050%葡萄糖和0.020%L-乳酸进行测定。
　　4、无机盐对葡萄糖和L-乳酸测定的影响通过改变溶液中NaCl和NH4Cl的浓度,测定0.100%葡萄糖和0.050%的L-乳酸标准品的变化。
　　5、葡萄糖和L-乳酸相互干扰实验在L-乳酸溶液中添加葡萄糖配成含不同浓度葡萄糖(0~0.100%)的0.040%的L-乳酸溶液,考察葡萄糖对L-乳酸测定的影响。在葡萄糖溶液中添加L-乳酸配成含不同浓度(0~0.050%)L-乳酸的0.100%葡萄糖的溶液,考察L-乳酸对葡萄糖测定的影响。

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